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有機(jī)酸分析柱詳細(xì)使用說(shuō)明

更新時(shí)間:2016-08-16      點(diǎn)擊次數(shù):2086
   作為有機(jī)酸分析柱的廠家,我們擁有豐富的產(chǎn)品經(jīng)驗(yàn),下面給大家介紹下有機(jī)酸分析柱的詳細(xì)使用說(shuō)明,希望可以給客戶一些借鑒參考。

  有機(jī)酸分析柱填充的是聚合物材料,需要特殊的維護(hù)。向柱內(nèi)導(dǎo)入以下介紹了的以外的有機(jī)溶劑會(huì)導(dǎo)致聚合物材料膨脹和過(guò)度增壓。因此,你應(yīng)當(dāng)在安裝柱子以前,先用異丙醇,然后用0.1N的硫酸十分*地沖洗管路以*去除有機(jī)溶劑。

  在使用這個(gè)有機(jī)酸分析柱之前,我們建議客戶應(yīng)熟讀有機(jī)酸分析柱的使用說(shuō)明。

  有機(jī)酸分析柱填充有氫形式的陽(yáng)離子排斥樹脂,特別開發(fā)用于在低牙條件下分離包括酒、果汁、奶制品、生物樣品、工業(yè)原料和環(huán)境樣品中的有機(jī)酸。

  一、洗脫

  推薦使用濃度范圍在0.002到0.05N的稀硫酸溶液。大多數(shù)的分析使用0.01N的硫酸(pH=±2.3)都可以獲得成功。其他的強(qiáng)酸例如磷酸和高氯酸也可以使用,但是鹵酸例如鹽酸不推薦使用,因?yàn)樗鼈儠?huì)腐蝕不銹鋼。

  當(dāng)有強(qiáng)酸用于柱子的洗脫液的時(shí)候,柱子就進(jìn)行了自身再生。所以,特別的再生步驟是不需要的。但是這樣并不能直接對(duì)洗提強(qiáng)度和大多數(shù)有機(jī)酸的保留性質(zhì)進(jìn)行校正,較強(qiáng)的洗提強(qiáng)度通常只減少zui后餾出的化合物的保留時(shí)間。

  在使用以前,所有的洗脫液都要用0.45μm濾膜過(guò)濾和脫氣。對(duì)于這個(gè)有機(jī)酸分析柱,使用有機(jī)相修正,例如乙腈(zui大20%),可以縮短保留時(shí)間。這樣做,總是會(huì)造成背壓的升高。所以,較高的操作溫度和較低的洗提流速通常可用于防止產(chǎn)生過(guò)高壓力。

  注意,一旦對(duì)柱子使用了有機(jī)相修正,柱子就會(huì)保留使用了有機(jī)相修正的洗脫液的色譜特性,即使洗脫液已經(jīng)恢復(fù)到原始的100%的水相,柱子的性質(zhì)也不會(huì)回到當(dāng)初發(fā)貨時(shí)的狀態(tài)了。

  因此,如果你的應(yīng)用中包括有芳香酸或不飽和酸,它們會(huì)出現(xiàn)較長(zhǎng)的保留時(shí)間,我們推薦使用芳香酸柱(Cat.no.28352),它是專門設(shè)計(jì)用于此類化合物的。

  二、流量和壓力

  推薦用于有機(jī)酸分析柱的流量是0.3-0.8ml/min。任何情況下洗脫流量都不能超過(guò)0.8 ml/min,記住柱子壓力產(chǎn)生的原因有洗脫流速,柱溫,洗脫液的黏度等等。

  要限制洗提流速,使泵壓力不超過(guò)2200PSI。在45°C,0.6ml/min流速時(shí),預(yù)期的壓力應(yīng)當(dāng)在600-1500 PSI之間。如果在此條件下,柱壓超過(guò)了1200 PSI,通常指示有污染物沉積在填充材料上,必須采取改正的措施。

  三、樣品準(zhǔn)備

  保持柱子長(zhǎng)壽的關(guān)鍵是進(jìn)樣前適當(dāng)?shù)牡臉悠诽幚?。你必須防止將脂肪,油脂,蛋白質(zhì)物質(zhì)和重金屬離子導(dǎo)入色譜柱,不管是流動(dòng)相還是樣品。特別地,要禁止導(dǎo)入顆粒雜質(zhì)。這些zui終都會(huì)造成操作壓力的增高而且非常困難或者不可能去除。

  生物樣品在注射以前必須除去蛋白質(zhì)。較好的除蛋白試劑是磺基水楊酸。

  通常使用的樣品量在10-50微升的范圍內(nèi),但是進(jìn)樣高達(dá)100微升應(yīng)當(dāng)沒有問(wèn)題。進(jìn)樣500微升或者更多可能會(huì)導(dǎo)致峰變寬或者融合。

  四、柱前過(guò)濾器

  柱前過(guò)濾器含有0.5-2.0um的多孔不銹鋼燒結(jié)物,安裝在樣品注射器和柱子之間用于從洗脫液中去除顆粒物。這樣可以防止分析柱產(chǎn)生壓力增高的問(wèn)題,延長(zhǎng)柱子的壽命。當(dāng)有保護(hù)柱的時(shí)候,柱前過(guò)濾器就可以不用了。

  五、保護(hù)柱

  保護(hù)柱應(yīng)當(dāng)用在這個(gè)柱上,因?yàn)闃悠泛拖疵撘何廴究赡軙?huì)造成柱壓力的增高。樣品中諸如鹽和蛋白質(zhì)類的污染物可能會(huì)使柱效降低,在注射進(jìn)柱子以前應(yīng)當(dāng)去除。

  六、溫度

  有機(jī)酸分析柱可以在20-90°C使用,提高柱溫會(huì)改善柱效。然而,柱溫也會(huì)樣品的保留,所以建議使用柱溫箱以保證得到可以重復(fù)的結(jié)果。

  由于某些分離對(duì)溫度非常敏感,所以有必要仔細(xì)地操控溫度以優(yōu)化分離效果。如果在室溫使用這個(gè)柱子,洗脫流速必須降低保持泵壓不高于2200PSI。

  七、貯存

  有機(jī)酸分析柱提供給你的時(shí)候使用0.01N的硫酸作為平衡。這也是建議的用于貯存的洗脫液。柱子在保存的時(shí)候,一定要使用提供的螺絲和墊圈將端口密封。色譜柱必須以這種方式使用和保存,在任何時(shí)候都要保證不使柱床干涸。不正確的貯存(沒有密封)或不正確的使用,會(huì)導(dǎo)致填充材料部分地干涸,會(huì)發(fā)生高的柱壓。在這種情形下,可以倒轉(zhuǎn)柱子,要以0.1ml/min的流速在90°C向柱子泵入0.01N的硫酸。

  以上是關(guān)于有機(jī)酸分析柱的詳細(xì)使用說(shuō)明,更多內(nèi)容咨詢上海宸喬生物科技有限公司。

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