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畜禽肉中土霉素,四環(huán)素,金霉素的測定

更新時間:2016-02-25      點擊次數(shù):3890

畜禽肉中土霉素,四環(huán)素,金霉素的測定
食品安全檢驗手冊 101 頁
1.原理 樣品中土霉素,四環(huán)素,金霉素經(jīng)提取,用微孔濾膜過濾后進(jìn) HPLC 色譜儀測定
2.試劑和材料
⑴乙腈 色譜純
⑵高氯酸 分析純;
⑶高氯酸溶液 5%(V/V)
⑷土霉素標(biāo)準(zhǔn)品 純度≥99%;
⑸土霉素標(biāo)準(zhǔn)貯備液 準(zhǔn)確稱取 10.0mg 土霉素,用甲醇配制濃度為 100μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)貯
備液。
⑹土霉素標(biāo)準(zhǔn)中間液: 準(zhǔn)確吸取 5.0mL 土霉素標(biāo)準(zhǔn)貯備液,于 50mL 容量品瓶中,加水稀
釋至刻度。搖勻,此液 1mL 含 10μg 氯霉素。
⑺土霉素標(biāo)準(zhǔn)系列溶液: 準(zhǔn)確吸取土霉素標(biāo)準(zhǔn)中間液 0.1,0.2,0.5,1.0,2.0mL 分別放于
10mL 容量瓶中,然后,各加水至 10.0mL. 搖勻,即得每 mL 含 0.1, 0.2, 0.5, 1.0 .2.0μg 的土霉素
標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。
3.儀器和設(shè)備
(1) 液相色譜儀,配有紫外吸收儀;
(2) 勻質(zhì)器;
(3) 離心機(jī):6000r/min。
4.測定步驟
(1) 提取 稱取試樣 5g(至 0.01g), 置于 50mL 離心管中, 加人 25mL 高氯酸溶液:
5%(V/V), 超聲提取 20min, 然后離心 10min ( 4000r/min )。取上清液,經(jīng) 0.45µm 濾膜

過濾后,濾液作 HPLC 用。
(2)測定液相色譜參考條件
色譜柱:Grace Smart C 18 250mmX4.6mm, 5µm;
測定波長: 350nm
流速: 1.0mL/min;
色譜柱溫度:室溫。
(3)色譜測定:
① 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 分別吸取土霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液各 20µL,在上述色譜條件下,進(jìn)行
HPLC 分析,以標(biāo)準(zhǔn)液濃度與峰面積進(jìn)行回歸分析。
② 樣品測定 按上述色譜條件下,進(jìn)樣 20µL, 進(jìn)行 HPLC 分析,根據(jù)保留時間和峰
面積,與標(biāo)準(zhǔn)比較進(jìn)行定性定量。外標(biāo)法定量。
5.結(jié)果計算
m
X
∨ ×
=
ρ
(1-71)
式中:
X—試樣中土霉素殘留量, μg/g
ρ—測定液中土霉素的含量, μg/mL
V--試樣溶液的體積, mL
m-試樣的質(zhì)量,g。
6.土霉素,四環(huán)素,金霉素色譜圖 1-78
1. 土霉素; 2.四環(huán)素;3

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